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高級邀請函范文第1篇

邀請函

光陰荏苒,歲月如梭,逝者如斯夫。轉眼間，我們從高州一中畢業(yè)已是一年半了。這一年七個月間，我們每個人所走的路不盡相同，或春風得意，或平平淡淡，或艱辛坎坷……但是，無論人生如何浮沉，也無論世事如何的變遷，我們都沒有忘記那份同學間的真摯友情。一年多的時間，什么都是浮云，我們還是原來的我們，不曾改變。

出于大家的共同愿望，也出于我個人的想法，我決定組織一次高中同學聚會。我們相約于2月4號(農歷正月初五，有可能會變)下午三點在一中校門口相見，不見不散哦!希望大家相互轉告，并都能來參加聚會!

我們的宗旨是“一個都不少”!有關同學聚會的具體情況，這幾天會以郵件的形式發(fā)到各位的郵箱里,請各位老同學查收,或直接聯(lián)系我們。

高級邀請函范文第2篇

【摘要】 目的：研究高效液相色譜法(high performance liquid chromatography， HPLC)同時測定健康人口服加味逍遙散(Modified XiaoYao Decoction， MXYD)后血清中阿魏酸和芍藥苷含量及其藥動學。方法：水浴法預處理血樣，HPLC法同時測定8名健康人在口服加味逍遙散濃縮湯劑后8個時間點各個血清樣本中芍藥苷與阿魏酸的血藥濃度。應用3P97藥動學分析軟件對血藥濃度時間數(shù)據(jù)進行擬合。選用香豆精為內標，芍藥苷和阿魏酸檢測波長分別為：0～10 min為230 nm和10～25 min為320 nm。結果：8名健康志愿者口服MXYD濃縮湯劑后，在血清中檢測到芍藥苷和阿魏酸。兩種化合物分離完全，未出現(xiàn)其他物質干擾峰，保留時間(retention time， Tr)分別為8.02 min和13.32 min，內標香豆素為19.14 min。芍藥苷和阿魏酸的平均回收率分別為100.9 %和95.3%，平均相對標準偏差（relative standard deviation，RSD）分別為3.4%和3.2%。用空白血清加標準品繪制標準曲線，芍藥苷線性范圍為40～1 280 ng/ml，信噪比為3時最低檢測線為5 ng/ml，最低檢測濃度為15 ng/ml（RSD=12.5%）；阿魏酸線性范圍為10～320 ng/ml，最低檢測線為0.65 ng/ml，最低檢測濃度5 ng/ml（RSD=9.7 %）。成分日間與日內精密度及準確度在92.1%～109.9%，且RSD

【關鍵詞】 加味逍遙散; 芍藥苷; 阿魏酸; 高效液相色譜; 藥動學

Objective: To simultaneously determine the contents and explore the pharmacokinetics of ferulic acid and paeoniflorin by high performance liquid chromatography (HPLC) after oral administration of Modified Xiaoyao Decoction (MXYD)， a compound of traditional Chinese herbal medicine.

Methods: A total of 8 healthy men were enlisted in this study. The serum samples were preprocessed by immersion method. The HPLC system was used to determine the contents of ferulic acid and paeoniflorin in the blood samples of the 8 healthy volunteers， and the blood was collected through the ulnar vein at 5 min， 10 min， 15 min， 30 min， 45 min， 1 h， 2 h and 3 h after MXYD administration. The dates of serum concentrationtime were fitted by using the 3P97 analytical program of pharmacokinetics. The internal standard (IS) was coumarin. The detection wavelengths of paeoniflorin and ferulic acid were 230 nm from 0 min to 10 min and 320 nm from 10 min to 25 min respectively.

Results: After MXYD administration， paeoniflorin and ferulic acid were separated completely in the serum and no other interfering peaks were found in the spectrum of the chromatograms. The retention times of the paeoniflorin and ferulic acid were 8.02 min and 13.32 min respectively， and that of the coumarin was 19.14 min. The mean recovery rates of paeoniflorin and ferulic acid were 100.9% and 95.3% with relative standard deviation (RSD) of 3.2% and 3.4%， respectively. The calibration curve for paeoniflorin was linear over the concentration range 401 280 ng/ml. Its lowdetection limit based on a signaltonoise ratio of 3 was 5 ng/ml and lowconcentration limit was 15 ng/ml with an RSD of 12.5%. Ferulic acid was in the range 10320 ng/ml; its lowdetection limit was 0.65 ng/ml and lowconcentration limit was 5 ng/ml with an RSD of 9.7%. The method was found to be highly precise， with an RSD

Conclusion: This is a study on simultaneously determining paeoniflorin and ferulic acid in serum of healthy volunteers after oral administration of MXYD. The assay is suitable for identifying the serum levels of ferulic acid and paeoniflorin in clinical investigations.

Keywords: Jiawei Xiaoyao Powders; paeoniflorin; ferulic acid; high performance liquid chromatography; pharmacokinetics

自擬加味逍遙散（Modified Xiaoyao Decoction， MXYD）由《太平惠民和劑局方》中的逍遙散加減而成，適用于治療抑郁［1］和脾氣虛型、肝郁脾虛型功能性消化不良［2］。阿魏酸和芍藥苷分別來自當歸和白芍，是該方的兩個主要成分。楊玉興等［3］應用高效液相色譜法（high performance liquid chromatography， HPLC）對人服用加味逍遙散后血清中的阿魏酸進行了定性和定量研究；Yang等［4］對狗服用精制后芍藥苷的藥動學進行了研究；羅煥敏等［5］對大鼠服用當歸芍藥散后體內芍藥苷與阿魏酸同時進行測定，并進行藥動學研究。人口服后這兩成分的同時檢測及藥動學研究未見報道。因此，我們利用HPLC對健康人口服加味逍遙散后血清中的芍藥苷與阿魏酸進行測定，以便指導加味逍遙散在臨床中的應用。

1 材料與方法

1.1 主要儀器 Waters HPLC，包括2996二極管陣列檢測器、2695自動進樣系統(tǒng)和EmpowerTM 數(shù)據(jù)處理軟件（美國Waters公司）；小神醫(yī)煎藥機（天津三延精密機械有限公司）；3P97藥動學分析軟件（中國藥理學會數(shù)學藥理專業(yè)委員會）。

1.2 藥品與試劑 自擬加味逍遙散由當歸25 g、白芍藥25 g、柴胡25 g、茯苓25 g、白術15 g、生姜10 g、大棗15 g、薄荷15 g、梔子15 g、甘草15 g、牡丹皮15 g、厚樸30 g、枳殼30 g和葛根40 g組成。藥材購自四川大學華西醫(yī)院門診中藥房，均經華西醫(yī)院中藥藥理實驗室鑒定為正品。加味逍遙散湯劑制備：按照處方比例精確稱取各組成藥物，總量2.7 kg，放入小神醫(yī)煎藥機中，添加8倍水，浸泡約30 min后煎煮，煮沸后繼續(xù)煎煮30 min，然后用4層紗布過濾；按上述方法重復煎煮1次。兩次煎出濾液合并，32 ℃減壓濃縮，使其終濃度為1 g/ml。冷卻后置于消毒容器中，密封保存于4 ℃冰箱內備用，用時搖勻，溫服。阿魏酸（批號為1107739910）、芍藥苷（批號為110736200423）和香豆素（批號為911216）標準品均購自中國藥品生物制品檢定所。

1.3 健康志愿者入選標準 健康男性8名，來源于招募者。納入標準：體格檢查正常；年齡19～40歲；體質量正常（在標準體質量±10%之內）；獲取知情同意，志愿受試。排除標準：有藥物及食物過敏史者；1個月內服用過藥物者；有暈血、暈針史；精神病患者；嗜煙、嗜酒者；既往有心、肝、腎、胃腸及造血功能障礙等嚴重疾病者；依從性差者。剔除標準：實驗后發(fā)現(xiàn)有違背實驗方案或使用過影響藥物測定的藥物和食物，可能干擾實驗結果者。終止實驗標準：從醫(yī)學角度考慮受試者有必要中止實驗者，如實驗過程中發(fā)生暈針、暈血，服藥后有不適感或過敏反應等。

本研究已獲得倫理委員會批準，自愿受試、體檢合格者入選。入選者于實驗前簽署知情同意書。

1.4 實驗方法

1.4.1 色譜條件 色譜柱為Inertsil ODS3（5 μm，4.6 mm×250 mm），流動相為甲醇︰0.5%乙酸水溶液（40︰60，v/v），選用香豆精為內標(internal standard， IS)；芍藥苷的檢測波長在0～10 min為230 nm；阿魏酸的檢測波長在10～25 min為320 nm。

1.4.2 標準品溶液配制 阿魏酸1 mg置于容量瓶內，加入50 ml甲醇搖勻；芍藥苷1 mg，甲醇定容至50 ml；取香豆素2 mg，甲醇定容至100 ml。3種溶液最終濃度均為20 mg/L。

1.4.3 給藥與采血 志愿者于實驗前3 d不得飲用啤酒、茶、咖啡及其他飲料；實驗前8 h不準進水和食物。實驗當天測定其空腹體質量及心率、脈搏、血壓；每位志愿者在服用濃縮中藥湯劑前抽取靜脈血，作為空白對照。取血后按5 g/kg口服一次中藥濃縮湯劑。服藥后計時，于服藥后5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、1 h、2 h和3 h于肘靜脈抽血5 ml；隨時記錄受試者出現(xiàn)的各種反應，遇特殊情況積極處理；口服中藥前與服藥后各時間點血標本于3 000 r/min離心10 min，獲得空白與含藥血清，分裝于1.5 ml EP管中，－20 ℃保存。

1.4.4 血清樣品的預處理 所有血清（包括空白血清、含藥血清及空白加入標準品的血清）均采用水浴法預處理。取1 ml血清放入10 ml試管中，在100 ℃沸水中10 min，攪拌60 s直至均勻，于8 500 r/min離心15 min，取100 μl上清進樣。

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1.4.5 制作標準曲線及測定最低檢測限 取6份1 ml空白血清，分別放入10 ml試管中，加入不同體積的芍藥苷和阿魏酸標準品溶液，使芍藥苷和阿魏酸在血清中的濃度分別為40、80、160、320、640、1 280 ng/ml和10、20、40、80、160、320 ng/ml。每管分別加入香豆素標準品溶液25 μl，充分混勻后采用上述水浴法預處理，HPLC測定。分別以芍藥苷、阿魏酸和內標香豆素的峰面積比與其濃度作線性回歸，得到回歸方程；當信噪比（signaltonoise， S/N）為3時確定芍藥苷與阿魏酸的最低檢測限。

1.4.6 精密度與回收率的測定 取3份1 ml空白血清，分別放入10 ml試管中，加入不同體積的芍藥苷和阿魏酸標準品溶液，使兩者在血清中的濃度分別為40、160、640 ng/ml和10、40、160 ng/ml 3個梯度。每管分別加入香豆素標準品溶液25 μl，充分混勻后按上述血清預處理方法處理后進樣100 μl檢測。重復上述實驗過程，5次/d，使用相同的樣品與方法連續(xù)測定5 d。以加入血清中芍藥苷和阿魏酸的量為標準值，實際測得的峰面積比值代入回歸方程計算出計算值，計算值與標準值相比求得回收率和日內精密度，并計算出相對標準偏差（relative standard deviation， RSD）。計算公式分別為：回收率=(計算值/標準值)×100%；精密度=(計算值的平均值/加入標準濃度)×100%；RSD=(標準差/平均值)×100%。

1.4.7 樣本血藥濃度的測定 對8名志愿者服藥后各個時間點的含藥血清進行預處理，以本實驗色譜條件進樣，得到芍藥苷、阿魏酸峰面積與香豆素峰面積的比值，將比值代入回歸方程，分別得到芍藥苷和阿魏酸的血藥濃度，并繪制血清藥物濃度與時間曲線。

1.4.8 藥代動力學參數(shù)的測定 采用中國藥理學會數(shù)學藥理專業(yè)委員會編制的3P97藥動學分析軟件對測得血藥濃度數(shù)值進行擬合得到一系列藥動學參數(shù)：最大出峰時間（time of maximum concentration， Tmax），最大血藥濃度（maximum concentration， Cmax）、分布相半衰期（t1/2α）、表觀清除率（apparent clearance， CL/F）和血藥濃度時間曲線下面積（area under concentrationtime curve， AUC）等。

2 結 果

2.1 芍藥苷、阿魏酸與內標香豆素的分離情況 芍藥苷、阿魏酸峰與內標峰，血清內源性物質及加味逍遙散吸收入血的其他成分峰均能很好地實現(xiàn)基線分離，無雜峰干擾；芍藥苷、阿魏酸和香豆素標準品在相同條件下進行對照，保留時間分別為8.02、13.32和19.14 min；對其紫外吸收峰予以定性分析，樣品的最大紫外掃描波長與標準品一致。見圖1和圖2。

2.2 標準曲線及最低檢測限 空白血清加入芍藥苷標準品后，在40～1 280 ng/ml濃度范圍內的線性回歸方程為y=59.5x+5.48（x代表峰面積比值，y代表血藥濃度）(r2=0.999 1)。S/N為3時最低檢測限為5 ng/ml，最低檢測濃度為15 ng/ml（RSD=12.5%）?？瞻籽寮尤氚⑽核針藴势泛螅?0～320 ng/ml濃度范圍內的回歸方程為y=161.3x－7.82（r2 =0.992 3），最低檢測限為0.65 ng/ml，最低檢測濃度為5 ng/ml（RSD=9.7%）。

2.3 回收率與精密度 健康人空白血清加入芍藥苷和阿魏酸標準品后的平均回收率分別為100.9%和95.3%，平均RSD分別為3.4%和3.2%。見表1。該方法檢測芍藥苷和阿魏酸日間、日內精密度在92.1%～109.9%，且RSD

2.4 血藥濃度測定 將健康人服藥后各個時間點血清中測得的芍藥苷和阿魏酸峰面積與內標峰面積相比，所得比值分別代入兩者的回歸方程，計算出血清中芍藥苷和阿魏酸的濃度并繪制血清藥物濃度時間曲線。見圖3。

2.5 藥動學參數(shù)的測定 本實驗成功地在服藥后健康人的血清中檢測到了芍藥苷和阿魏酸，并建立了同時檢測芍藥苷與阿魏酸的高效液相色譜法，使用藥動學軟件得到藥動學參數(shù)（表4）。藥動學參數(shù)顯示人口服MXTD后芍藥苷和阿魏酸被吸收入體內，兩者的最大濃度時間大約在服藥后45 min左右，然后逐漸下降。表4 芍藥苷與阿魏酸在血清中的藥動學參數(shù)

3 討 論

湯藥進入體內后，血清成分多樣，欲確定方劑體內血清成分譜，必須建立湯藥進入體內多成分測定方法。本實驗完成了健康人口服大復方MXYD濃縮劑后芍藥苷與阿魏酸在血中的測定研究，利用HPLC法對芍藥苷與阿魏酸同時測定，為其他藥效成分的測定方法和藥動學研究打下了一定基礎，對臨床治療功能性消化不良的中藥復方的質量、用量等監(jiān)測有一定意義。

MXYD治療功能性消化不良療效確切。由于是大復方，其中所含化學成分可達幾百種，但進入人體的成分才可能是藥效成分，所以研究服藥后進入人體的成分才能更好地了解加味逍遙散的藥理作用。對于MXYD的藥動學研究已有開展，但報道多數(shù)是單味中藥［3］或者動物實驗［6］。中藥藥動學研究最終要回歸于對人體的實驗。故本實驗以“復方效應成分動力學”假說和“生物方劑分析中醫(yī)藥學”思路為理論指導基礎，應用HPLC法分析了人口服加味逍遙散后吸收入體內成分芍藥苷與阿魏酸的藥動學。

本實驗建立的檢測方法顯示了較好的線性關系，具有較好的精密度和準確度。有報道使用內標法根據(jù)回歸方程計算得到兩者的血藥濃度，通過對大鼠血清中阿魏酸與芍藥苷的藥動學研究，結果顯示兩者最大血藥濃度出現(xiàn)時間在2 h和3 h，半衰期1～2 h［5］，明顯大于本實驗結果。這說明不同實驗對象對藥物的吸收與體內反應是不同的。本實驗方法適用于人口服加味逍遙散濃縮煎劑后芍藥苷與阿魏酸血藥濃度的測定，為進一步研究加味逍遙散中代表療效的靶成分以及臨床用藥量化依據(jù)打下了基礎。

【參考文獻】

1 Yu GH， Liang SC， Sun QZ， et al. Study on modified Xiaoyao Decoction combining clomipamine in treating depression. Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 2007; 27(4): 318320. Chinese with abstract in English.

余國漢， 梁紹財， 孫祺章， 等. 加味逍遙湯合并氯米帕明治療抑郁癥的對照研究. 中國中西醫(yī)結合雜志. 2007; 27(4): 318320.

2 Ren P， Huang X， Li SQ， et al. Effect of modified Xiaoyao powder on electrogastrographic picture and pharmacokinetic characteristics of ferulic acid in patients with functional dyspepsia of Ganqi stagnation with Pideficiency syndrome type. Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 2006; 26(5): 398402. Chinese with abstract in English.

任平， 黃熙， 李雙慶， 等. 加味逍遙散對功能性消化不良肝郁脾虛型患者胃電圖及阿魏酸藥動學特征的影響. 中國中西醫(yī)結合雜志. 2006; 26(5): 398402.

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楊玉興， 黃熙， 任平， 等. 肝郁脾虛證患者口服加味逍遙散后阿魏酸的血藥濃度HPLC測定法. 南京中醫(yī)藥大學學報. 2003; 19(2): 8688.

4 Yang XG， Peng B， Zhang GH， et al. Studies of the pharmacokinetics of paeoniflorin in two JingZhiGuanXin formulations after oral administration to beagle dogs. J Pharm Biomed Anal. 2006; 41: 320324.

5 Luo HM， Li XG， Xiao F， et al. Study on pharmacokinetics of ferulic acid and paeoniflorin in AngelicPaeonia Root Powder. Zhong Yao Cai. 2003; 26(3): 189192. Chinese with abstract in English.

羅煥敏， 李曉光， 肖飛. 當歸芍藥散中阿魏酸和芍藥苷的藥代動力學研究. 中藥材. 2003; 26(3): 189192.

高級邀請函范文第3篇

seropharmacological effect of tujian mixture on phospho-akt and pten of glomerular mesangial cell cultured in high concentrations of glucose yin de-hai1, liang xiao-chun1, zhang hong2, et al (1.peking union medical college hospital, beijing 100730, china;2.institute of basic medical science, chinese academy of medical sciences, beijing 100730, china)

abstract：objective to observe the effects of serum containing the medicine of tujian mixture on phospho-akt and phospho-pten of glomerular mesangial cell (mc) cultured in high concentrations of glucose. method the glomerular mesangial cells from sd rat were divided into six groups：the normal control group, the group of mc cultured in high concentrations of glucose, and four other groups cultured in high concentrations of glucose + different concentrations of rat’s serum containing tujian mixture. after 72 hours, the content level of phospho-akt (thr308) and phospho-pten (ser380) in mc was detected by using sandwich elisa. results the level of phospho-akt (thr308) in the group of mc cultured in high concentrations of glucose was significant higher than that in the normal control group (p<0.01). the level of phospho-akt (thr308) in the groups with serum containing tujian mixture was significant lower than that in the group of mc cultured in high concentrations of glucose (p<0.01). the effects indicated a remarkable change with different dosage of tujian mixture. furthermore, the level of phosphated pten (ser380) in the group of mc cultured in high concentrations of glucose was significant lower than that in the normal control group (p<0.01). the level of phosphated pten in the groups with serum containing tujian mixture was significant higher than that in the group of mc cultured in high concentrations of glucose (p<0.01). the effects also indicated a relationship with the dosage of tujian mixture. conclusion chinese herbal medicine tujian mixture can increase the level of phosphated pten and inhibit activation of akt in cultured mc in high concentrations of glucose.

key words：tujian mixture;glomerular mesangial cell;diabetic nephropathy;pi3k-akt signaling pathyway;pten

糖尿病腎病最為關鍵的病理改變是腎小球細胞外基質(ecm)的逐漸堆積,最終導致腎小球的硬化。wWw.133229.COm腎小球系膜細胞(mc)發(fā)生表型轉化,由靜止表型轉化為增殖/分泌表型,細胞肥大,大量分泌ecm,同時基質蛋白的降解減少是造成腎小球ecm堆積的原因。我們既往的研究發(fā)現(xiàn),中藥菟箭合劑可以減少糖尿病大鼠mc的表型轉化,減輕腎小球系膜區(qū)ecm的堆積,顯著降低糖尿病大鼠尿蛋白的排泄量[1]。有研究發(fā)現(xiàn),磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)-akt信號通路異常激活是糖尿病腎病mc細胞肥大、ecm異常分泌重要機制[2],本研究觀察了菟箭合劑含藥血清對高糖條件培養(yǎng)的mc磷酸化akt和pi3k/akt的抑制物類脂磷酸酶pten影響。

1 材料與方法

1.1 菟箭合劑含藥血清的制備

正常sd大鼠,體重250～280 g,購自北京大學醫(yī)學部實驗動物科學部,許可證號：skxk(京)2006-0008。適應性喂養(yǎng)3 d后按每100 g體重2 ml的劑量灌胃菟箭合劑口服液(菟絲子、鬼箭羽和漢防己,三藥比例為1∶3∶1,中藥飲片購自北京同仁堂藥店,水煎制成口服液,每1 ml含原藥材1 g),每日灌胃2次,連續(xù)3 d,末次灌胃后2 h進行麻醉(12%烏拉坦,每100 g體重1 ml腹膜內注射),頸動脈插管取血,3 000 r/min離心10 min取血清,5 ml分裝,-20 ℃保存待用。正常sd大鼠血清的制備除按每100 g體重灌胃自來水2 ml外,其余同含藥血清的制備。

1.2 大鼠系膜細胞的培養(yǎng)及分組

sd大鼠(體重100～120 g)按經典方法培養(yǎng)、鑒定大鼠腎小球mc[3]。取第4代細胞用于本實驗。從培養(yǎng)瓶中消化mc,制成1×106/ml濃度的細胞懸液,接種于10 cm直徑的培養(yǎng)皿中,每個培養(yǎng)皿接種5 ml細胞懸液,加完全rpmi 1640培養(yǎng)液(含20%胎牛血清,l-谷氨酰胺2 mmol/l,青霉素100 u/ml,鏈霉素100 u/ml,丙酮酸鈉2 mmol/l,胰島素0.6 u/ml,hepes 12.5 mmol/l)至15 ml/皿,置培養(yǎng)箱中(37 ℃、5%co2)孵育,24 h細胞貼壁良好后換不含胎牛血清的培養(yǎng)液靜置24 h。將培養(yǎng)液中胎牛血清換為不同條件大鼠血清,分為6組：正常對照組(5 mmol/l葡萄糖,20%正常大鼠血清),高糖組(30 mmol/l葡萄糖,20%正常大鼠血清),高糖+1倍含藥血清組(30 mmol/l葡萄糖,20%含藥大鼠血清),高糖+4倍稀釋含藥血清組(30 mmol/l葡萄糖,20%用4倍正常大鼠血清稀釋的含藥大鼠血清),高糖+8倍稀釋含藥血清組(30 mmol/l葡萄糖,20%用8倍正常大鼠血清稀釋的含藥大鼠血清),高糖+16倍稀釋含藥血清組(30 mmol/l葡萄糖,20%用16倍正常大鼠血清稀釋的含藥大鼠血清)。

1.3 系膜細胞磷酸化akt和pten的檢測

使用cell signaling公司的磷酸化akt(thr308)和磷酸化pten(ser380)雙夾心elisa試劑盒檢測。按其操作說明書進行：加入不同處理因素培養(yǎng)液培養(yǎng)大鼠mc 72 h后,棄培養(yǎng)液,4 ℃下pbs沖洗細胞,每一培養(yǎng)皿(10 cm直徑)加0.5 ml細胞溶解液,刮下細胞,移至試管中,4 ℃微量離心取上清液即是細胞溶解液,以一次使用的樣品量儲存于-80 ℃待用。檢測時用樣品稀釋液稀釋細胞溶解液至適合的倍數(shù),根據(jù)預實驗結果最終樣品稀釋倍數(shù)磷酸化akt為1倍稀釋液稀釋、磷酸化pten為8倍稀釋液稀釋。加100 μl稀釋后的細胞溶液至相應的微孔中,按操作說明書依次完成加一抗、hrp連接二抗、tmb底物、終止液等操作步驟,最后用酶標儀以450 nm波長讀取樣品吸光值。

1.4 統(tǒng)計學方法

應用spss13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析,各組間均數(shù)比較采用方差分析。

2 結果

(見表1)表1 各組mc磷酸化akt和磷酸化pten的比較注：與正常對照組比較,p<0.01;與高糖組比較,*p<0.05,**p<0.01

3 討論

腎小球mc的肥大和ecm合成的增多等細胞表型和功能的改變是糖尿病腎病病理變化的基礎[4],導致mc表型和功能改變的機制目前并不完全清楚,可能是多種因素共同作用的結果。pi3k-akt信號通路在調控細胞的增殖、分化、凋亡中起關鍵作用,pi3k-akt通路由胰島素和多種細胞因子受體激活,引發(fā)在pi3k作用下的第二信使三磷酸磷脂酰肌醇(pip3)的堆積,進而引發(fā)akt在308位蘇氨酸和407位絲氨酸的磷酸化,磷酸化akt進而誘發(fā)一系列細胞下游事件,促進細胞的存活、增殖與分化,阻斷細胞的凋亡。pten是細胞內pi3k/akt信號通路的主要負調節(jié)物,通過催化pip3的3位磷酸基團脫磷酸,使pip3形成pip2,降低了pip3水平,從而阻斷pi3k/akt信號通路。有研究發(fā)現(xiàn),糖尿病大鼠腎小球內pten表達顯著減少、akt活性升高,通過重組pten腺病毒轉染腎小球mc使其過度表達pten,可抑制高糖誘導的mc肥大[2],提示糖尿病腎病時mc表型和功能的改變可能與pi3k-akt信號通路的異常(pten表達的降低、akt的異常激活)有關。

pi3k-akt信號通路的調控是一個非常復雜的過程,包括胰島素受體、受體酪氨酸激酶、整合素受體、多種細胞因子受體、g蛋白耦聯(lián)受體均與pi3k-akt信號通路的激活有關。糖尿病腎病時存在多種以上受體激活的因素,因而可造成pi3k-akt異常激活,從而可能造成mc的肥大和ecm異常分泌等細胞表型和功能的改變。然而,糖尿病腎病時更為重要的pi3k- akt信號通路的異常改變使pten活性降低,pten活性的降低使pi3k-akt信號通路持續(xù)處于激活狀態(tài),可能是糖尿病腎病時mc肥大和大量分泌ecm的重要機制,提高pten活性可能是治療糖尿病腎病的重要靶點。

我們既往的研究發(fā)現(xiàn),中藥菟箭合劑可以減少糖尿病大鼠mc的表型轉化,減輕腎小球系膜區(qū)ecm的堆積[1]。為了進一步研究菟箭合劑的作用機制,我們觀察了菟箭合劑對高糖條件培養(yǎng)的mc磷酸化pten和akt的作用。結果表明,高糖條件培養(yǎng)的mc磷酸化pten水平顯著降低,而磷酸化akt水平顯著升高,菟箭合劑含藥血清則可顯著升高mc細胞內磷酸化pten水平,同時顯著降低磷酸化akt水平。

本實驗中我們采用將所有組別大鼠mc培養(yǎng)液中的胎牛血清用大鼠血清替換的方法,藥物干預組與對照組之間的差別僅為是否為含藥血清和含藥血清稀釋濃度的差別,從而排除了由于血清種類不同對實驗結果的干擾。

【參考文獻】

[1] 尹德海,梁曉春,鄭法雷,等.糖尿病大鼠腎小球mc表型轉化及菟箭合劑的作用[j].中國中西醫(yī)結合雜志,2003,23(10)：772-776.

[2] mahimainathan l, das f, venkatesan b, et al. mesangial cell hypertrophy by high glucose is mediated by downregulation of the tumor suppressor pten[j]. diabetes, 2006,55(7)：2115-2125.

高級邀請函范文第4篇

法律顧問的邀請函范文一尊敬的XX商會領導：

您好!

十分感謝您于百忙之中閱讀本函件。幾分鐘寶貴時間的耗費，不平凡經營理念的誕生，我相信您一定會物有所值的!

當前，我國許多單位對于聘用律師的認識還基本停留在有麻煩、打官司找律師，即訴訟律師的層面上。然而事實上，律師在投資、融資、改制、提供見證、認證等方面，也可以起到十分積極、甚至不可替代的作用。此外，聘請律師很重要的一個作用是防患于未然，企業(yè)有許多經營活動，如果事先有律師參與，提供相關的法律意見和建議，則完全可以避免事后不必要的訴訟和紛爭，從經濟效益角度講，前期花一些律師顧問費，要比出現(xiàn)問題后再聘請律師效益更高。

因為，在各類復雜的法律事務面前，非專業(yè)人士處理起來往往力不從心，事倍功半，有時甚至誤入歧途。對于法律的漠視與無知更有可能招致無法挽回的敗局。當深陷危局之時，才想起律師，殊不知，此時已經冰凍三尺了。這時不管聘請多么高明的律師，都難以在短期內化解危機，付出的代價將可想而知。

聰明的企業(yè)決策者可能已經意識到，為成功地避免企業(yè)運營過程中可能出現(xiàn)的各類致命性風險，聘請專職執(zhí)業(yè)律師擔任常年法律顧問，在做出重大決策之前聽取律師的建議，可以成功地避免后患，其睿智程度無異于以極小的代價購買多份蘭德公司的報告結論。

因此， 我所愿竭誠為貴商會提供常年法律服務。為了能讓貴商會感受到我們的誠意，我們擬定為貴商會提供一次免費的法律服務。服務的形式可以是講座、培訓、法律咨詢或是其他形式，具體方案會在于貴商會溝通后及時提出。

若貴商會對我們的這次免費法律服務感到滿意，愿意聘請我們做為貴商會法律顧問的話，我們將會為貴商會及會員提供如下服務項目：

一、專業(yè)訴訟服務

民事、商事、刑事、行政等訴訟案件，勞動仲裁、普通經濟仲裁等仲裁案件。

二、非訴法律服務

法律顧問、法律咨詢、各類合同審查、律師函、參與重大項目合同談判、出具專業(yè)法律意見書、法律風險盡職調查等非訴法律服務。

順頌

商祺!

XXXX律師事務所

20xx年十月二十一日

法律顧問的邀請函范文二尊敬的 黃耀和 律師(老師)：

為了提升律師辦理企業(yè)并購與重組業(yè)務的技能，提高企業(yè)并購與重組律師服務的品質，我們決定開辦一期并購與重組律師專業(yè)技能高級研修班。該班擬聘請國內資深并購與重組律師、高校知名并購重組學者、政府主管部門專家以及并購重組糾紛審判專家聯(lián)袂授課。

鑒于您在業(yè)界的學術地位、成就和影響，我們真誠地聘請您為點睛網高級培訓師，并邀請您在百忙之中撥冗前來為本班授課。現(xiàn)就本班的有關情況向您報告如下：

一、本班名稱

本班名稱：并購與重組律師專業(yè)技能高級研修班。 二、時間安排

1、20xx年3月26至20xx年 月 日之間，共授課8-10天。 2、授課時間為上午9.00時-12.00時，下午1.30時-4.30時，晚上(如有)6.30時-9.30時。

3、每天面授上課共6個小時，即8節(jié)課(45分鐘/課)。 三、授課方式

1、本課程開設面授班和遠程班，采取面授、網絡、光盤等立體覆蓋教學模式。即北京學員在現(xiàn)場聽課(同時錄制網絡課件);外地學員在網上聽課;不能或不愿上網的學員，通過課件光盤、講課錄音和教材講義等方式學習。

2、特別敬請各位老師理解本班的立體教學模式，并許可我們在面授的同時以網絡視頻、光盤課件或講義教材等方式使用本課程內容進行教學使用，并取得相應回報與收益。

3、如無特殊約定，每位老師每次授課安排半天(即3小時，4節(jié)課)，每次詳細講授1-2個實務技能專題。

四、聽課對象

1、面授班即在現(xiàn)場聽課的對象為北京市及周邊地區(qū)執(zhí)業(yè)在二年以上的律師，計劃招收70人。

2、遠程班即在網上聽課的對象為全國各地的執(zhí)業(yè)在二年以上的律師，每班計劃招收學員100人。

五、授課內容

1、詳見附件一(課程單元表)。

2、我們建議您的授課方向為《并購與重組律師業(yè)務概論》。具體內容請老師確定大綱，填入回執(zhí)表反饋我們。我們收到您的反饋意見后進行統(tǒng)一協(xié)調平衡，最終確定您的講課內容。

3、重要建議：選題盡量考慮律師業(yè)務的實用性、不宜太大，小題大作為好;以案例教學;課后可留15-20分鐘互動;盡量每20分鐘左右講完一個章節(jié)，以方便網絡課件的分集制作。

六、授課時間

我們希望您20xx年 月 日上午(或在此后至20xx年 月 日間的周六或周日，預選一個半天)前來授課，并填寫回執(zhí)告訴我們，或者電話商量具體授課時間。 七、課酬回報

1、課酬：授課老師每小時課酬標準為1000元，講課半天為3小時計3000元整。如果您認為以上課酬太低，請將您所期待的數(shù)額反饋我們再行商定。

2、雜費：授課老師的交通費、住宿費由我們安排報銷，中午工作餐或晚餐我們負責招待。

八、確認邀請

授課老師如果同意接受我們的聘請，可以下列方式反饋意見： 1、填寫以下回執(zhí)(見附件)，通過email或傳真發(fā)回我們。 2、直接在電話中確定講課時間和講課內容。 邀請函回執(zhí)

聯(lián)系方式

聯(lián)系人：王XX(教務)XXXX

XX(主編)XXXXXXXX

邀請人：XXX

XXXX年XX月XX日

法律顧問的邀請函范文三尊敬的各位同仁：

20xx年是國家xx規(guī)劃的開局之年，我們盈科律師事務所亦將緊隨國家經濟發(fā)展的宏觀布局，調整思路，開拓進取。近幾年礦產行業(yè)和礦業(yè)企業(yè)成為了國民經濟中的重中之重，越來越稀缺的礦產資源勢必掀起更高的投資熱潮。而基于礦產能源行業(yè)的飛速發(fā)展，對專業(yè)的礦業(yè)法律服務的需求也將隨之迅猛增長。

在剛剛過去的 20xx年，盈科律師事務所礦產資源法律事務部已與國內外各礦業(yè)投資機構、各礦業(yè)協(xié)會、tcm礦業(yè)總裁班等諸多礦業(yè)精英群體進行了充分的溝通并達成共識，同時結合盈科律師的專業(yè)優(yōu)勢及人脈資源，一個集礦業(yè)投融資和法律服務為一體的全國性礦業(yè)服務平臺已初具規(guī)模。為了更進一步的發(fā)展，盈科律師事務所礦產資源法律事務部決定，邀請有意于礦業(yè)發(fā)展方向的律師同仁加盟本部，共同打造盈科礦業(yè)服務體系，以總所礦業(yè)部為紐帶，在各分所聯(lián)合設立分所礦業(yè)部，組建一支不少于四十人的礦業(yè)服務團隊，形成一個全國性的礦業(yè)投融資平臺和專業(yè)的礦業(yè)法律服務平臺。

現(xiàn)將具體內容通知如下：

一、分所礦業(yè)部(或專職礦業(yè)律師)設立及人員要求。

1、分所礦業(yè)部(或專職礦業(yè)律師)設立要求：根據(jù)分所實際情況可選擇設立分所礦業(yè)部或專職礦業(yè)律師，并設固定聯(lián)系人一名，專人一對一地與總所礦業(yè)部聯(lián)系。每個分所以個人名義加盟的專職礦業(yè)律師原則上不超過2名。

2、人員要求：由于礦業(yè)服務的專業(yè)性與特殊性，申請加盟盈科礦業(yè)

的律師，必須符合下列條件之一：. 分所礦業(yè)部負責人或專職礦業(yè)律師;【法律顧問邀請函】

. 擁有礦產資源類企業(yè) 3年以上工作經歷;

. 擁有為礦產資源類企業(yè)提供過 3年以上的法律、會計、金融或相關服務的工作經歷; . 擁有 10位以上礦產資源行業(yè)的客戶或者有意投資礦業(yè)的投資類客戶。

加盟律師須能夠承受一定的工作壓力，能夠完成總所礦業(yè)部的工作安排，包括但不限于承擔礦業(yè)部期刊相關專題的撰稿工作等。

3、具體流程：

(1)加盟律師，須填寫申請表(附件1)，并請同時附上個人簡歷(附件2)、相關業(yè)績及近期個人照片，由當?shù)胤炙魅魏炇鹜?，?0xx年3月20日前發(fā)送至郵箱：。

(2)加盟律師須做出聲明，同意總部可將其信息用于宣傳推廣和業(yè)務投標;

(3)總所礦產資源法律事務部將對提交的申請進行審核和評價，審核通過的律師，須與本部簽訂《盈科礦業(yè)律師合作框架協(xié)議》，方可成為本聯(lián)盟的正式成員律師。

二、總所礦業(yè)部的優(yōu)勢及支持。

1、總所礦業(yè)部的優(yōu)勢：

(1)資源優(yōu)勢

在十幾年的醞釀期中，我們與諸多礦業(yè)投資機構、礦業(yè)協(xié)會、勘察機構等已建立了廣泛而密切的聯(lián)系，擁有充足的客戶群，掌握了大批的礦業(yè)投融資項目。

(2)人脈優(yōu)勢

經過多年的經營，礦業(yè)部亦與各地相關政府機構保持了良好的溝通，其中包括國土資源部、各省國土廳等司局級單位。同時也與多家教育及培訓機構、勘察機構、礦交所等建立了緊密

的戰(zhàn)略合作關系，平臺廣闊，人脈資源豐富。

(3)見解獨到

礦產資源法律事務部團隊成員均畢業(yè)于國內一流法學院，團隊核心成員兼具礦業(yè)從業(yè)背景，對礦業(yè)產業(yè)的現(xiàn)狀和前景無論在整體把握還是局部分析上均具獨到見解，認識深刻、視野開闊，并具實際可操作性。

(4)信息共享

受礦業(yè)本身專業(yè)性強的影響，礦業(yè)法律服務受眾面相對較窄，因此如何對外推廣是各個分所礦業(yè)(或專職礦業(yè)律師)加盟后第一個要面臨的問題?？偹媱澩ㄟ^定期舉辦礦業(yè)法務講座、召開全國性或地域性礦業(yè)行業(yè)會議、發(fā)行礦業(yè)部專業(yè)期刊等方式有針對性的向客戶進行推廣，在維系既有客戶群的基礎上挖掘潛在客戶群。同時，這部分信息也將免費提供給各加盟律師。需要提醒的是，各分所加盟律師簽約后應積極掌握礦業(yè)行業(yè)動態(tài)，增加礦業(yè)相關知識儲備，緊跟總所推廣步伐。

2、總所礦業(yè)部支持：為了把盈科礦業(yè)打造成全國性的行業(yè)平臺，提升盈科礦業(yè)服務的影響力，更為了律師個人在礦業(yè)領域內的快速發(fā)展，打造有競爭力的專業(yè)礦業(yè)律師團隊，礦業(yè)部將居中協(xié)調，為資源的整合保證暢通的溝通渠道。礦業(yè)部將通過以下方式對加盟律師給予有力支持，幫助加盟律師樹立專業(yè)形象，使相應客戶群體能以最直接的方式看到并了解團隊律師在礦業(yè)法務、投融資領域的優(yōu)勢。. 總所礦產資源法律事務部將對成員律師進行具體、實時的業(yè)務指導;

. 成員律師可以成為中國礦業(yè)交易網的正式會員，可以利用該網絡平臺免費、獲取、交流礦業(yè)信息;

. 定期舉辦礦業(yè)律師專業(yè)研討會;

. 定期出版專業(yè)期刊《盈科礦業(yè)法律專刊》;成員律師可以擔任期刊的編委、撰稿人，可將該期刊作為專業(yè)資料寄送客戶;該期刊將對成員律師進行包裝、推薦。

. 合作開展各項礦業(yè)法律服務，如交易信息及投融資渠道的共享、合作開展礦業(yè)并購項目等;

三、收益分配

礦業(yè)律師的收益來源主要是兩方面：一是來自專業(yè)的礦業(yè)法律服務，二是來自項目居間信息服務。礦業(yè)法律服務項目包括礦產能源投資項目的收購與重組，礦產能源企業(yè)的反向收購、私募、海內外上市與融資，礦產能源企業(yè)礦權法律事務等多個方面;項目居間信息服務主要是礦業(yè)律師通過各種方式幫助項目轉讓方和受讓方對接，最終促成交易完成。

收益分配原則，按所里規(guī)定辦理，具體項目可特殊處理。

四、結束語

隨著xx各項規(guī)劃的展開，礦業(yè)行業(yè)面臨更為深化的全面洗牌，各礦業(yè)企業(yè)間的橫向聯(lián)合和縱向整合將是未來的發(fā)展趨勢。而近幾年各地方政府對推進礦業(yè)企業(yè)的改革的關注也持續(xù)升溫。這對法律服務工作者來說既是機遇也是挑戰(zhàn)。盈科律師事務所礦產能源法律事務部本著快速發(fā)展，

合作共贏的理念，誠邀所內有識有志之士加入礦業(yè)團隊，互助互利，共同打造金牌礦業(yè)法律服務團隊，共創(chuàng)美好未來!

聯(lián)系方式：XXXXXXX

高級邀請函范文第5篇

醫(yī)院推廣會是指醫(yī)藥企業(yè)的產品獲準進入或已經進入大、中型醫(yī)院后，企業(yè)和醫(yī)院聯(lián)合召開的一種產品介紹會。目的是通過向醫(yī)生介紹產品的藥理研究、毒性實驗、臨床使用、功能主治等多方面的情況，增加醫(yī)生對產品的認識，促進醫(yī)院使用量的增長。 醫(yī)院推廣會操作步驟

一、與藥劑科主任約定時間和地點。時間一般為下午下班前1～2小時，地點最好安排在醫(yī)院的會議室。醫(yī)院會議室一般有幻燈機、投影儀、電視機、錄像機等，企業(yè)銷售代表講課時使用，產品介紹效果會更佳。

二、確定到會對象。一般為正副院長、藥房主任、采購、相關科室的醫(yī)生等（確保請到權威醫(yī)生）。同時，與藥劑科主任確定到會人員的紀念品。紀念品最好為廠家生活化的廣告促銷品，以便醫(yī)生記住企業(yè)名稱和產品名稱。

三、會議程序

1.會前備齊簽到冊、宣傳資料、幻燈片、錄像帶、廣告禮品等，調試會場各種儀器，粘貼廣告畫，可做橫幅、掛旗，標明“某某企業(yè)某某產品介紹會”字樣。

2.與會代表報到時，由醫(yī)藥代表及其主管做接待，遞送名片，發(fā)放紀念品及資料，請醫(yī)生登記姓名、職務、職稱、住址、聯(lián)系電話等，以便于將來聯(lián)系。

3.會議由院方藥劑科主任主持。首先作人員介紹；其次由廠方較高級別代表致歡迎詞，作公司介紹，邀請院領導講話；最后由該醫(yī)院的區(qū)域醫(yī)藥代表作產品介紹。如能請到當?shù)貦嗤t(yī)生講課，則效果更佳。

4.產品介紹之后，可組織簡單問題的搶答賽，并發(fā)放獎品，以加強醫(yī)生的記憶及對產品宣傳資料的了解、閱讀。

5.會議結束后致答謝詞，并進行會場整理，以給院方留下良好的印象。

四、注意事項

1.會議時間不宜太長，最好控制在1小時左右；

2.著裝一定要職業(yè)化，演講用普通話；

3.每次推廣會最好只介紹一種產品或某一類型的產品，以切實加強宣傳記憶的效果；

4.推廣會以后，當?shù)氐尼t(yī)藥代表最好在三天以內開始第一次拜訪，并保持一定的頻率。

商業(yè)推廣會一般是指醫(yī)藥企業(yè)充分利用商業(yè)客戶的網絡關系，以會議的方式，將產品導入醫(yī)院、藥店、診所或調往其他商業(yè)客戶的一種方法。它主要有導入醫(yī)院型，導入藥店、診所型，商業(yè)平調型，綜合型等幾種形式。 商業(yè)推廣會操作步驟

一、會前的準備工作

1.與醫(yī)藥商業(yè)客戶的經理協(xié)商，確定會議類型，并根據(jù)會議類型確定邀請對象。

2.確定會議規(guī)模，成立會務組，選擇會場，發(fā)出邀請函。

邀請函的制作可決定到會人員的多少及開會時的拿貨準備狀態(tài)。一般的醫(yī)藥企業(yè)和商業(yè)企業(yè)在開會時只將開會的時間、地點及產品情況告之邀請對象，邀請對象在開會前準備狀態(tài)較差；而湖南懷化正好制藥有限公司在產品的邀請函中卻注明了許多東西：時間、地點、公司簡介、產品簡介、推廣會的內容及程序、訂貨訂單及政策、廣告播放情況、服務承諾等，效果非常好，許多與會代表剛到會場便送來了訂單。

3.醫(yī)藥企業(yè)代表必須在開會前將貨發(fā)至醫(yī)藥商業(yè)客戶處。

4.會務費原則上由醫(yī)藥企業(yè)出，但也可協(xié)商解決。

5.制定商業(yè)業(yè)務員獎勵政策及客戶進貨讓利政策，以調動他們的積極性。

二、會場布置

1.會議地點一般為賓館、客戶的會議室等。

2.會議的主席臺上方懸掛產品推廣會橫幅，并標明商業(yè)客戶名和醫(yī)藥企業(yè)名，會場門口置歡迎詞板、臺卡、陳列樣品及宣傳品。

3.醫(yī)藥企業(yè)備齊各種資料，商業(yè)公司備好發(fā)票。

4.主席臺上可設置摸獎箱，放置獎品。

三、會議內容

1.會議簽到，發(fā)放飲料、宣傳冊、價目單、小禮品，會議程序表等。

2.會議由商業(yè)客戶的經理主持，由醫(yī)藥企業(yè)最高級別代表介紹企業(yè)的宗旨、理念、目標、發(fā)展戰(zhàn)略、產品銷售形勢等公司情況；由醫(yī)藥代表或當?shù)貦嗤t(yī)生介紹產品情況、使用情況，增強到會代表訂貨的信心。

3.組織搶答賽，以激活氣氛。

4.醫(yī)藥企業(yè)的銷售代表和商業(yè)客戶的業(yè)務員要積極宣傳，拿訂單，對一些重點客戶晚上也須加強訂貨公關活動。

5.抽獎及兌獎可放于活動的最后(訂貨基本完畢)進行。

四、注意事項

1.醫(yī)藥企業(yè)的銷售代表與商業(yè)客戶在會后須馬上清理訂單，將訂貨客戶分類；對于訂貨量大的客戶須加強跟蹤服務，對于訂貨量小的客戶也可用信函、電話加強聯(lián)絡，確保銷售的良性循環(huán)。

2.會后及時兌現(xiàn)對商業(yè)客戶業(yè)務員的承諾，調動其送貨、收款、服務的積極性。

3.調整客戶貨源、庫存，并加緊收款工作。

五、各種類型商業(yè)推廣會的側重點

1.醫(yī)院型：在現(xiàn)階段，由于大中城市醫(yī)院進藥管制加強，因此，公關進藥后，召開單個的醫(yī)院推廣會較為適宜。但在縣級醫(yī)藥市場，采用醫(yī)院型推廣會，可以快速地占領廣大的農村區(qū)、鄉(xiāng)醫(yī)院。

2.藥店、診所型：一般應選擇大中城市，在當?shù)厥袌鐾斗艔V告以后，或者在大中型醫(yī)院銷售較好的情況下，通過商業(yè)推廣會鋪開市場。同時，也可利用日用消費品助銷理念，招聘DTC代表做市場。